观察根尖分生组织细胞的有丝分裂PPT

实验目的观察植物细胞有丝分裂的过程了解有丝分裂各时期细胞内染色体和DNA的变化特点掌握植物组织培养的一般方法和步骤实验原理有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的...

实验目的观察植物细胞有丝分裂的过程了解有丝分裂各时期细胞内染色体和DNA的变化特点掌握植物组织培养的一般方法和步骤实验原理有丝分裂是真核生物进行细胞分裂的主要方式，是细胞增殖的主要途径。在植物体内，如根尖分生组织细胞分裂十分活跃，能不断进行细胞分裂，以补充因伸长而衰老或因分化而减少的细胞。根尖取材的优点是分裂旺盛，细胞大而整齐，易于识别，而且制备简单，可连续观察各时期。通过植物组织培养技术可以培养出无菌的幼苗，这一方法具有繁殖速度快、周期短、可大量生产遗传性状一致的优质植株等优点。本实验采用MS培养基，其特点为营养成分比较全面、数量较少，有利于诱导愈伤组织及根芽分化。实验步骤1. 材料的选取与处理选择洋葱、蒜等易诱导、增殖和分化的材料作为外植体。将外植体用自来水冲洗30min，然后用70%酒精浸泡约1min，无菌水冲洗数次，再用1%NaClO消毒处理10～15min，无菌水冲洗5～7次。切取外植体的幼嫩部分（如洋葱的内表皮或蒜的叶片）作为外植体。2. 愈伤组织的诱导和分化将消毒的外植体放在无菌滤纸上吸干水分，然后将外植体放入MS培养基中，25℃进行暗培养，约2周后愈伤组织可分化出不定芽和胚状体。若需要大量的小植株用于生根发芽成完整的植株，需对分化出不定芽的愈伤组织进行继代培养，扩大繁殖倍数。3. 根的诱导与培养将分化出不定芽的愈伤组织转移到生根培养基中，约1周左右可长出不定根。生根培养基为：MS+0.05mg/L IAA+0.1mg/L GA₃+3%蔗糖+0.6%琼脂，pH5.8。4. 炼苗与移栽当小植株长到2～3cm时，将其从培养瓶中取出（瓶内小植株根系发达），移植到日光温室内的沙土或蛭石等基质中，温室环境条件需保持适宜的光照、湿度和温度。若要获得无菌苗，需将瓶内的小植株取出后，移植到消毒过的基质中。注意事项实验过程中要严格遵循无菌操作原则包括外植体的消毒处理、培养基的灭菌等实验过程中要避免材料受到污染一旦发现污染应及时采取措施防止扩散注意控制好光照、温度和湿度等环境条件以保证植物的正常生长和发育在进行移栽时要注意不要损伤植物的根系和茎叶部分以免影响植株的生长和发育在实验过程中要保持观察记录及时准确以便更好地了解植物的生长和发育情况注意安全问题特别是在使用酒精、NaClO等有毒有害药品时要注意个人安全和环境保护在实验结束后要及时清理实验室环境卫生和清洗器具等后续工作